我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 12:00:16
我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因?

我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因?
我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因?

我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因?
原因在于测序时经历了PCR反应及测序反应(测序反应本身也是PCR反应)二次聚合酶的打滑现象.原因不明的复杂结构,测序结果就出现突然信号减弱或消失.出现这些现象的原因由DNA模板本身立体结构所造成的.
当DNA碱基中含GC含量高的时候,从某一位置开始聚合酶的聚合反应便无法进行下去.这样的情况,建议可以尝试换用反向引物进行测序.或者是将PCR产物做一个TA克隆后再测序,可以根本上解决测序信号中断的问题.

多大的片段啊,可能是片段太大,可以多设计几条引物!以前测的都很顺利,就是这次没有回来结果。300bp左右那就重新提取吧,先做个菌液PCR试试那个不会啊,我们都是做的最普通的PCR那就重新测序喽,很正常的,不行的话,换个测序公司,哈哈祝你成功!...

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多大的片段啊,可能是片段太大,可以多设计几条引物!

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多大的条带 拿通用引物去测一下 可能是里面有loop结构300bp,是高GC含量的,也测过很多次了,不知道这次是什么问题?可能是里面有一些自连形成Loop了测不过去 重新P一次就是已经重新做个一次了,还是没有结果。换一家测序公司~ 或者拿通用引物测一下恩 知道了 谢谢...

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多大的条带 拿通用引物去测一下 可能是里面有loop结构

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我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因? PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办 pcr产物电泳后为何条带过宽,而且有的条带清晰,有的则不清晰 PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. pcr电泳问题我的pcr出现不正常现象,好几次第一次都没p出东西来 之后我又用第一次p出来的产物再p,终于p出了正常的条带.然后我想多p一些保存,之后我还是用第一次p出来的产物再p之后又不太 PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来 PCR扩增不出来条带的原因? 为什么篮斑做PCR菌液鉴定也能P出来条带呢我用蓝白斑做的 T载体和目的片段连,为什么篮斑的 做PCR菌液鉴定也能P出来条带呢? 我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带 我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂? PCR电泳marker条带清晰,但是样本的条带有的缺失,有的是有条带,但不是我所想要的,请问有什么原因? PCR产物条带浅怎么办 PCR产物跑胶有很多条带,但最亮的那个条带大小和我要的不一样,我想重做一次PCR,得怎么调整啊 电泳时总DNA没有条带,但是能P出来,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,这能说明我得到的想要的目的片段了吗? 二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么?