引物加酶切位点以后还要分析吗?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/06 02:24:37

引物加酶切位点以后还要分析吗?
引物加酶切位点以后还要分析吗?

引物加酶切位点以后还要分析吗?
看样子你是要做克隆,给你说说我的经验吧,
带酶切位点的引物设计：保护碱基（4个）+酶切位点（6或8个）+与模板匹配序列（15-20个）.如果是一般的质粒做模板15个配对的绝对没问题,如果是比较复杂的模板,文库一类的,20-25个.
保证3‘端的5个碱基里有3个是G/C就行.我从来不用软件分析的.
PCR时,退火温度就是60度,25个循环.
你试试吧,肯定没问题的,我以前设计引物时也是很小心的,用软件分析半天,其实发现没有多大影响的.发卡结构,3’封闭,GC含量,TM值,影响也都不是这么大.
纯属经验,希望你的实验有好结果吧

可不可以详细一点？

不知道你想问什么问题就是我设好引物后加了双酶切位点，但是不知道是否需要在DNMAN或者Primer5.0上进行分析？在Primer5.0上进行酶切位点分析后发现发夹结构这儿有一个是红的，不知道这样子好不好扩增？这样子哦，你设计好的引物得分是多少（加了酶切位点）要是80分以上的话可以试试，还有你的TM是多少度，这个温度最好是60以上这样保险。在Primer 当然可以分析了这个分析只能是个参...

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不知道你想问什么问题

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引物加酶切位点以后还要分析吗? 有关PCR引物设计好像引物设计好以后,还要添加什么保护碱基,有时还要添加酶切位点,这些东西添加进去后,不是无法和模板链连接起来了吗?除非是把引物设计的所有要求统一起来,在模板链上为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?如题.设计表达引物有什么要求吗? 扩CDS的引物能做基因的表达分析吗语文总结要分析错因还要写以后怎么做考研数学还要考泛函分析吗? 分析了库伦力还要分析电场力吗? 新桥规出来以后,粗集料压碎值还要换算吗? PCR引物前面如何加酶切位点 PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果我删去三个就不配对了（只是下游引物）,影响这是引物二聚体吗? 反转录需要引物吗磷化以后为什么还要皂化, 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? 有关PCR技术问题引物是可以直接和单链DNA进行配对的吗?如果该单链DNA中（非3’端）可以和引物进行配对,那为什么引物还要从3’端开始?而不直接与中间的进行配对呢?而且为什么每次配对都 SPSS相关性不显著还要继续回归分析吗 SPSS相关性不显著还要继续回归分析吗汉语结构分析打完架以后以后在这里是什么词?这句话是定中短语吗?还是?