跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 20:52:04
跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗?

跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗?
跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗?

跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗?
扩增时候可能退火温度低了,本来不能与引物紧密配对的片段也阔出来了.
重新扩增吧.

跑了PCR,目的条带出来了,但是送到公司测序结果不理想,都是非特异性结合,是什么原因?需要做纯化吗? 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? 电泳时总DNA没有条带,但是能P出来,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,这能说明我得到的想要的目的片段了吗? 求PCR,PCR获得的目的基因中含有SalI酶切位点,而引物也引入了salI位点,现在一双酶切就切出来3条带, 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 挑克隆鉴定时PCR有目的条带但是酶切没有做分子克隆时,铺板长出很多菌落,于是挑克隆鉴定.PCR扩增目的基因有目的条带,但是酶切重组质粒又只有一条带,酶切时间已经延长至过夜了.挑了好多 PCR老P不出来是什么原因,解决办法是什么?我是用手提和试剂盒都提DNA,但是全都P不出来,引物用的是799f-1492r,肯定的没问题的,然后PCR时加了BSA,不但样品P出来了,阴性对照也有目的条带,而且很明 菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事 RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 PCR目的条带的问题,cDNA模板没有问题,因为我的actin能跑出来.可是我的目的条带一直扩不出来,换了引物还是不管用.用别人肯定扩出来的引物去P,还是没有目的条带.这是为什么啊? PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因 PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 DNA琼脂糖凝胶电泳marker跑了两次不出来什么原因?提纯质粒后跑胶,marker跑了两次不出来,目的条带出来了但是很弥散.怀疑是胶的原因,1%的胶,EB加了3ul,以前加这个量和同样地配胶方法目的条带 我的目的基因目前只知道部分序列,现在需要克隆出这个基因全长来,我已经合成了RACE模板及引物,进行了PCR,一直没有出来目的条带 PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来 关于T-A克隆的一些问题我做完了T-A克隆,提取质粒以后,用我的目的基因引物做PCR,跑电泳跑出来了目的条带,但是有一些杂带,是怎么回事呢. 我最近做PCR,目的条带是321bp,但是我扩出来的阴性对照都有条带,而且和样本条带扩出来的一样我级别太低,没办法上传图片,我用的是PCR Master Mix,两种不同厂家的做出来的阴性对照都有条带 PCR后跑胶结果受产物温度影响吗我是上午跑的胶,跑出了目的条带和非特异性条带。到了下午我叫别人跑了一下,就只得到了一条目的条带了。这事这么回事啊!(难道是人品)他说就只是