求invitrogen trizol 试剂盒说明书?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/04 20:26:18

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从组织中提取总RNA 1)液氮研磨,组织块直接放入研体中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮, 再研磨,如此三次,按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol,转移入离心管进行第2步操作. 2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol,另外,组织体积不能超过Trizol体积的10%,否则匀浆效果会不好,用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟. 从细胞中提取总RNA 1) 培养贴壁细胞：不须消化,可直接用Trizol进行消化、裂解,Trizol体积按10cm2/ml比例加入. 2) 悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞. 2．细胞或组织加Trizol后,室温放置5min,使其充分裂解.注：此时可放入-70℃长期保持. 3．12000rpm 离心5min,弃沉淀. 4．按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振荡混匀15分钟,室温放置15min.注：禁用漩涡振荡器, 以免基因组DNA断裂. 5．4℃12000g离心15min. 6．吸取上层水相,至另一离心管中.
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